Western雜交時,為確認(rèn)蛋白是否轉(zhuǎn)至PVDF膜上,可用下列方法對膜上蛋白進行可逆性染色。
1. 氨基黑染色
染液:0.5% Amido Black (w/v), 25% isopropanol (v/v) and 10% acetic acid.
染色:將PVDF膜置于染液中染色數(shù)鐘,ddH2O 脫色。
2. 考馬氏亮藍(lán)染色
染液:0.1% Coomassie Brilliant Blue R-250 (w/v) and 50% methanol (v/v)
脫色液:40% methanol (v/v) with 10% acetic acid (v/v)
染色:將PVDF膜置于染液中染色15 min.,脫色液脫色。
3. 麗春紅染色Ponceau S
染液:0.2% w/v Ponceau S in TCA (3% v/v)
染色:將PVDF膜置于染液中染色5min
脫色:ddH2O 脫色
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